医学电镜观察问题简析 I ——培养细胞TEM观察
李伯勤
引言:
☻ 医学电镜观察特点 〖 TEM观察，是一个研究过程 〗
与其他医学影像学观察（CT、MRI、组织病理…）的区别 ：
a.有规律性，多处于积累阶段，较少直接诊断；
b.又”小“（s小）又”大“（信息量）又多”变“（发展）；
c.立足各自领域观察研究，专职难度大
☻医学电镜观察之前 〖 做好准备，事半功倍 〗
a.备好优质样品；
b.复习相关医学基础知识；
c.充分检索文献；
d.对目标结构，建立清晰的观察思路；
☻医学电镜观察分析过程〖 发挥TEM观察的客观性，避免各种原因造成的观察分析问题
a.客观评估样品质量；
b.运用基础知识+文献，观察记录有价值的视野，避免按图索骥； ［1,2］
☻培养细胞TEM观察问题
细胞器在不同生理 / 病理 / 取材制备等条件下，会发生各种变化。
◆ 外来的变化——细胞株的问题、技术上微小瑕疵，都会被电镜放大而形成干扰像。所以，在进行观察之初，首先要识别
a.细胞株源头是否存在问题
b.细胞富集-固定过程
c.制备过程是否存 在问题；如果存在问题（发生率较高），那么还要判断：由此造成的
d.损伤干扰像对研究结果的影响程度；针对那些不得不保留干扰像的观察，在分析细胞超微结构变化时，须统筹考虑叠加的干扰信息。所以，观察者除了熟悉细胞的超微结构，还要掌握电镜技术。
◆内部亚显微结构的变化——a. 容易混淆的亚细胞结构辨识问题；b. 由冷冻电镜、3D电镜引入2D电镜的亚细胞观察以及统计学分析问题。
1. 培养细胞TEM观察干扰像问题简析
1-1 细胞富集-固定-保存 有问题，出现干扰像
1-2 取材时间点、或细胞生存状态欠佳
1-3 培养细胞源头被微生物污染，出现干扰像
1-4 细胞送实验室后，制备技术问题，出现干扰像（略）
在培养细胞的科研实验中，发现存在大概率微生物污染问题：由病原体感染所造成的细胞病理改变，会干扰课题实验应发生的超微结构变化，使得培养细胞实验失去科学意义。上次报告后，已知有不少课题组改善了细胞质量，但目 前各地送来的细胞仍不容乐观，不仅是影响电镜观察，重要的是造成极大浪费。微生物感染细胞，光镜难以识别，导致很多分子生物学实验的误差。TEM 不仅能清晰辨识是否有微生物感染，还可区分不同微生物特征，同时表征由此 造成的培养细胞超微结构变化。用好电镜，可以帮到更多课题组，减少浪费。
